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Glycomix™ SAX結構示意圖
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Glycomix™ SAX離子交換色譜柱專為帶多電荷聚糖類化合物的分離而設計。填料基質為窄粒徑分布的親水聚合物顆粒,在聚合物顆粒的親水表面化學鍵合強陰離子交換基團——季銨基。
Glycomix™ SAX 技術參數
特性 |
Glycomix™ SAX |
官能團
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季銨基
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表面特性
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親水
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pH范圍
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2 - 12
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4.6×250 mm柱的柱壓
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0.22 mL/min為10 bar
1 mL/min為38 bar
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最大柱壓
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~ 1,500 (psi)
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鹽濃度范圍
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20 mM - 2.0 M
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最高溫度
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~ 80 (°C)
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流動相兼容性
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水相和有機相
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應用
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肝素,帶多電荷聚糖
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● 均勻一致的粒徑確保了高分辨率和分離的高效性
● 高批間重現性
● 寬pH范圍(2-12)
● 從分析級到制備級規模
● 適于肝素和聚糖的分離和分析
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高批間重現性
由于嚴格控制的表面化學和樹脂生產工藝,Glycomix樹脂具有高批間重現性,使得色譜柱性能非常穩定。在肝素鈉的檢測中,保留時間的批間分離偏差小于1%,峰面積則小于5%。
圖1. 三個批次GlycomixTM SAX樹脂的高批間重現性

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色譜條件 |
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Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×250mm |
Mobile phase: |
A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0
B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 |
Flow rate: |
0.22 mL/min |
Gradient: |
20% - 90% B in 60 minutes |
Wavelength: |
202 nm |
Temperature: |
25 °C |
Injection volume: |
10 µL |
Pressure: |
9.5 bar |
Sample: |
20 mg/mL 肝素鈉
1 mg/mL 硫酸皮膚素 (DS)
1 mg/mL 多硫酸軟骨素 (OSCS) in H2O |
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批間的峰保留時間相對標準偏差
Peak Name |
Lot A |
Lot B |
Lot C |
RSD% |
Chondroitin Sulfate B |
12.286 |
12.300 |
12.434 |
0.41% |
Heparin |
21.71 |
21.723 |
21.919 |
0.44% |
OSCS |
33.936 |
33.853 |
34.114 |
0.32% |
色譜柱壽命長
先進的表面化學結構和穩定的生產工藝使得GlycomixTM SAX具有長的色譜柱壽命。下圖顯示了同一色譜柱在重復進樣時的分離性能。該柱展現了穩定的分離效率。
圖2. 重復進樣的疊加圖
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色譜條件 |
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Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×250mm |
Guard Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×50mm |
Mobile phase: |
A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0
B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 |
Flow rate: |
0.22 mL/min |
Gradient: |
20% - 90% B in 60 minutes |
Wavelength: |
202 nm |
Temperature: |
25 °C |
Injection volume: |
10 µL |
Pressure: |
9.5 bar |
Sample: |
20 mg/mL肝素鈉
1 mg/mL 硫酸皮膚素 (DS)
1 mg/mL多硫酸軟骨素 (OSCS) in H2O |
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不同上樣量下的靈敏分離
GlycomixTM SAX能夠從標準品中分離出其他組分。在圖3中,圖A是20 mg/mL Heparin、1mg/mL DS和1 mg/mL OSCS的標準品色譜圖,圖B是濃度為1 mg/mL的OSCS色譜圖。兩圖相對比可知,DS和肝素鈉之間的小峰來自OSCS標準樣品。色譜條件同圖4。
GlycomixTM SAX可用于肝素鈉及其雜質的定量分析。圖4為不同上樣量下的分離譜圖,其中肝素鈉濃度從0.5 mg/ml到10 mg/ml,OSCS的濃度從0.125 mg/ml到4 mg/ml,DS的濃度從0.25 mg/ml到4 mg/ml。在測試濃度范圍內,相對偏差R2值超過0.99。
圖3. OSCS標準品和肝素鈉摻入DS與OSCS的色譜疊加圖
圖4. 不同肝素鈉進樣的色譜疊加圖,其中肝素鈉從0.5mg/mL到10mg/mL, DS從0.125 mg/m到4.0 mg/mL,OSCS從0.25 mg/mL到4.0 mg/mL
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色譜條件 |
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Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×250mm |
Guard Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×50mm |
Mobile phase: |
A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0
B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 |
Flow rate: |
0.22 mL/min |
Gradient: |
20% - 90% B in 60 minutes |
Wavelength: |
202 nm |
Temperature: |
25 °C |
Injection volume: |
10 µL |
Pressure: |
10 bar |
Sample: |
20 mg/mL 肝素鈉
0.2 mg/mL 硫酸皮膚素(DS)
0.2 mg/mL 多硫酸軟骨素 (OSCS) |
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圖5. 硫酸皮膚素(DS)、肝素鈉和多硫酸軟骨素(OSCS)的校準曲線
色譜柱性能比較
經比較, 在肝素鈉的分離上,GlycomixTM SAX優于D品牌的柱子。下圖是用GlycomixTM SAX分離肝素鈉的色譜圖,硫酸皮膚素(DS)和肝素鈉之間的分離度為3.8,肝素鈉和多硫酸軟骨素(OSCS)之間的分離度為5.8。美國藥典(USP)對于DS/heparin和OSCS/heparin的分離度分別是1.0和1.5。GlycomixTM SAX的分離性能遠遠高于USP規定的要求。而D品牌色譜柱對于DS/hepari和heparin/OSCS的分離度分別為1.1和1.8。
圖6. 肝素鈉、硫酸皮膚素和多硫酸軟骨素在GlycomixTM SAX上的分離
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色譜條件 |
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Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×250mm |
Guard Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×50mm |
Mobile phase: |
A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0
B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 |
Flow rate: |
0.22 mL/min |
Gradient: |
20% - 90% B in 60 minutes |
Wavelength: |
202 nm |
Temperature: |
25 °C |
Injection volume: |
10 µL |
Pressure: |
10 bar |
Sample: |
20 mg/mL 肝素鈉
0.2 mg/mL 硫酸皮膚素(DS)
0.2 mg/mL 多硫酸軟骨素 (OSCS) |
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產品
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ID × 長度 (mm)
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訂貨號
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Glycomix SAX
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4.6 × 250 mm
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901665-4625
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Glycomix SAX保護柱
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4.6 × 50 mm
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901665-4605
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Glycomix 方法包
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色譜柱 + 保護柱
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901665-KIT
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肝素鈉(Heparin Sodium)
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50 mg
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HP-50
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硫酸皮膚素(Chondroitin Sulfate B)
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5 mg
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CS-5
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多硫酸軟骨素(Oversulfated Chondroitin Sulfate)
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5 mg
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OSCS-5
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注:以上為常備規格訂貨信息,其它規格或特殊定制產品,電詢。
產品手冊
使用說明書
Glycomix離子交換色譜柱使用說明書(English)